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通过扩大细胞培养系统容量,可以大规模培养动物细胞以生产生物制品。目前,利用动物细胞大规模培养技术所生产的生物产品包括酶、单克1隆抗1体以及多种疫1苗等生物制品或者基因工程产品。细胞培养虽然具有以上的一系列优点,但是也有其不足之处,主要是以下几点。
(1)体外培养的动物细胞对营养的要求较高。一次性3D三维细胞培养仪RCCS-D动物细胞培养液中往往需要多种氨基酸、维生素、辅酶、核酸、piao呤、嘧1啶和生长因子等,在很多情况下还需加入10 %的胎牛或新生牛血1清。
(2)动物细胞生长缓慢,对环境条件要求严格。动物细胞培养不仅需要严格的防污染措施,同时还需用空气、氧、二氧化碳和氮的混合气体进行供氧和调节pH。
(3)体外培养的细胞与体内生长的细胞存在或多或少的差异。组织和细胞离体之后,独立生存在培养环境中,缺乏在体内时的血液供应和神经体液调节作用,其生物学行为与体内生长时相比会发生某些变化。即使当前模拟体内技术发展很快,但终究是一种人工条件,始终不如真正的体内生存条件perfect。因此在利用培养细胞作研究对象时,切不要与体内细胞等同起来,实验结果轻易做出判断。
经过了近十多年既漫长又短暂的发展,iPS细胞技术已经取得了举世瞩目的进展。一个个突破性的成果既给我们带来了喜悦,也带来了新的挑战,细胞重编程有望迎来一个新的研究浪潮。尽管iPS细胞有着诱人的应用前景,DAB底物,然而,未来iPS细胞的研究也面临着许多亟需解决的问题:
首先,效率问题。目前,诱导产生iPS细胞的率仍然很低,这与基因导人的方式整合位点、表观遗传学等多种因素有关。这已成为制约iPS从实验室走向临床的zui大瓶颈。因此,如何提高iPS细胞的制备效率仍是人们普遍关注的问题。
第二,安全性问题。现在诱导iPS细胞通常借助逆转录病毒为载体,将几种癌基因转入分化细胞诱导其成为iPS细胞,而这种方法就有可能会因为外源基因插入细胞基因组,干扰了内源基因的表达,从而诱发cancer。
iPS存在的风险
1. iPS 与ES细胞基因表达虽很相似,但iPS细胞存在遗传缺陷.
2. iPS细胞的成瘤性,不同体细胞来源的iPS细胞成瘤性有差异.因此,应选择适当的供体细胞或筛选安全型IPS细胞克服IPS细胞临床cure的成瘤性.
3. iPS细胞及其体外诱导分化细胞的异质性.体细胞重编程不充分(partiallyreprogrammed IPSCs)、筛选标准不严紧和iPS细胞携带供体.细胞的表观遗传记忆和iPS 细胞分化不定向都导致细胞异质性,异质性是导致iPS细胞成瘤的潜在因素
4. iPS细胞体外定向分化细胞的功能与行为研究尚少,尤其在细胞cure上,目的细胞是否会在cure靶位或迁移到非靶位点成瘤,或异位形成组织等是亟待阐明的问题.